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常压室温等离子体在γ-聚谷氨酸生产菌种选育方面的应用研究 |
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是由D-谷氨酸和L-谷氨酸单体通过γ-谷氨酰胺键聚合而成的一类均聚氨基酸。γ-PGA具有极佳的生物可降解性、成纤维性、可塑性、保湿性等许多独特的理化和生物学特性,这些特性使γ-PGA及其衍生物在医药、环保、农业等多个领域具有十分广阔的应用前景。
目前生产γ-PGA的方法主要有化学合成法、微生物发酵法和生物酶转化法。与其他方法相比,微生物发酵法具有培养条件温和、过程简单、分子量分布适中的优点,因此,应用最广泛。发酵菌株是影响微生物发酵产率的关键因素之一。目前,γ-PGA的发酵菌株以枯草芽胞杆菌居多,短小芽胞杆菌和地衣芽胞杆菌等也能产生γ-PGA。由于野生菌的γ-PGA产量较低,因此,要想达到较高产量通常需要对原始菌株进行高产突变株的诱变选育,并且针对菌体生长需求优化培养条件以提高γ-PGA产量。
沈飞翔等以产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)枯草芽胞杆菌菌株SY-ND为出发菌株,采用常压室温等离子体技术对其进行诱变,在诱变致死率为80%~98%的条件下,通过检测突变菌株发酵产γ-PGA的量,筛选得到一株高产菌株SY-ND-SFX029。依照该条件经过48h发酵,菌株SY-ND-SFX029的γ-PGA产量达35.3 g·L-1,比出发菌株SY-ND的γ-PGA产量18.9 g·L-1提高86.8%[1]。
陈双喜等,以γ- 聚谷氨酸产生菌枯草芽孢杆菌HD11经常压室温等离子体诱变处理,以不产生脂肽作为筛选标准之一,获得1株高产菌株HNCL1266,其γ-聚谷氨酸摇瓶发酵产量为26 g/L,较原始菌株提高了30%,且遗传稳定[2]。
杜丹清等,以实验室保藏的一株产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis QY-27 为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP)诱变,筛选获得一株遗传性能稳定的高产γ-聚谷氨酸突变菌株Bacillus licheniformis QS-21,该突变菌株γ-聚谷氨酸的产量较出发菌株提高了42.26%,达到15.89g/L[3]。
邱宜斌等,通过ARTP筛选具有更高γ-PGA产生能力的诱变菌株,经过ARTP处理90s后,与野生型菌株相比,突变菌株显示出细胞重量的极大提升,获得的γ-PGA产量提高。该突变菌株的细胞外水解酶活性提高,可以在发酵液中检测到,与促进γ-PGA的产生协同作用。突变株不仅提供了改进γ-PGA生产的基础,还提供了高效生产γ-PGA的生产方法[4]。
参考文献:
[1] 沈飞翔, 李秀颖, 胥维昌,等. 产γ-聚谷氨酸枯草芽胞杆菌菌株的高效诱变及发酵条件优化[J]. 氨基酸和生物资源, 2015, 37(1). [2] 陈双喜, 张二超, 张乐乐等. γ-聚谷氨酸生产菌株的常压室温等离子体诱变选育[J]. 中国医药工业杂志, 2015(09):29-32. [3] 杜丹清, 王刚, 庹有朋等. γ-聚谷氨酸生产菌种的ARTP诱变及其发酵条件优化[J]. 食品与发酵科技, 2017, v.53;No.202(06):9-14. [4] Yibin Qiu, Yatao Zhan, Yifan Zhu, et.al. Improving poly(γ-glutamic acid) production from a glutamic acidindependent strain from inulin substrate by consolidated bioprocessing.[J]. Bioprocess and Biosystems Engineering, 42, s1711–1720(2019).
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文章来源:http://www.biobreeding.com/te_news_media_c729/2020-03-04/27961.chtml |