ARTP诱变选育TreY-TreZ途径高产海藻糖菌株 及酶促反应条件优化
来源： 作者： 发布时间：2017-07-13 17:23 浏览量：456
本期向您推荐的是江南大学史仲平教授团队等2017年5月发表在在《食品工业科技》上“ARTP诱变选育TreY-TreZ途径高产海藻糖菌株及酶促反应条件优化”，内容简要如下：
海藻糖的性质非常稳定，能够在高温、干旱、冷冻、高渗等恶劣的条件下保护生物分子结构不被破坏，在生物制剂、医药、食品、化妆品等领域有着广泛的应用前景。以廉价的淀粉为原料，利用麦芽寡糖基海藻糖合成酶（MTSase，Tre Y基因编码）和麦芽寡糖基海藻糖水解酶（MTHase，Tre Z基因编码）的协同作用，即TreY-TreZ途径转化海藻糖，已成为工业化生产海藻糖的重要方法之一。
为了提高海藻糖的转化率，江南大学史仲平教授团队利用ARTP技术处理节杆菌属菌株 Arthrobacter sp. SH，筛选后得到了一株以淀粉为原料Tre Y-Tre Z途径生产海藻糖的高产突变菌株Arthrobacter sp. SH-52。该突变菌株酶催化能力达到129.6 U/m L，较出发菌株提高了46.1%。对菌株 Arthrobacter sp. SH-52 的酶促反应条件进行优化，结果表明，酶促反应最适温度 45℃，最适反应时间30 h，最适初始 pH 6.5，最适底物为浓度 20% 的淀粉液化液（DE值为11.9）。经酶促反应优化后，采用未经纯化的粗酶液进行催化，转化率达到 37.6%。该研究结果表明，ARTP诱变是选育高酶活海藻糖生产菌的有效方法。
精选内容如下：
ARTP诱变与突变株的筛选
图 1 等离子体处理 Arthrobacter sp. SH 的致死率曲线
Fig.1 The lethal rate of Arthrobacter sp. SH treated by ARTP
表 1 菌株的诱变筛选
Table 1 The screening result of Arthrobacter sp. SH
诱变菌株SH-52粗酶液酶法制备海藻糖的工艺优化
表 2 海藻糖合成途径的初步验证
Table 2 Preliminary validation of trehalose synthesis pathway
图 2 反应温度对转化率的影响
Fig.2 Effect of reaction temperature on conversion rate
图 3 反应初始 pH 对转化率的影响
Fig.3 Effect of initial pH on conversion rate
图 4 DE 值对粗酶液催化反应的影响
Fig.4 Effect of DE value on conversion rate
图 5 反应时间与底物浓度对转化率的影响
Fig.5 Effect of reaction time and substrate concentration on conversion rate
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