雄烯二酮高产菌的复合诱变选育
来源: 作者: 发布时间:2019-11-15 16:36 浏览量:62
本期为您推荐宁夏泰瑞制药股份有限公司张萍研究团队发表在《中国抗生素杂志》上的一篇文章:雄烯二酮高产菌的复合诱变选育。
文章摘要内容如下:
雄烯二酮(4-androstenedione,AD),作为甾体激素类药物重要的中间体,是许多激素药物的原材料。由于用化学合成的方法生产甾体药物存在诸多限制,人们开始用微生物转化法得到甾体药物重要的中间体AD。微生物转化法反应条件温和,受原材料约束少,对环境污染小,因此越来越多运用到了甾体药物的生产过程中。但目前由于菌种的转化率低,大规模生产受到限制。
本研究以一株雄烯二酮产生菌RADy17-22为出发菌株,先用常温室压等离子(ARTP)处理90s,再用紫外(UV)照射50s,其致死率为98.6%,正突变率为62.3%。最终选育出3株雄烯二酮高产突变株RAD17-35、RAD17-56和RAD17-79,其产雄烯二酮的能力分别较出发菌株提高了45.3%、60.9%和67.2%,经斜面接种连续传代5次,遗传性状稳定。
ARTP是一种新型诱变技术,具有活性粒子浓度高,气体温度低,操作简单,运行成本低廉,本身对环境无污染危害等特点。与传统诱变方法相比,ARTP可造成DNA损伤的多样性,突变率高,更容易获得遗传稳定性良好的突变株。本研究以雄烯二酮产生菌为出发菌株,进行常压室温等离子(ARTP)和紫外(UV)复合诱变,最终选育出3株雄烯二酮高产突变株。
文章精彩内容如下:
图1 ARTP诱变的致死率和正突变率
表2 复筛结果
表3 稳定性验证