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复合诱变野生酵母ZZ-46选育高产油脂菌株

来源:    作者:    发布时间:2020-12-29 09:24    浏览量:71

 

本期为您推荐江南大学生物工程学院孙付保教授研究团队发表在《食品与发酵工业》上的一篇文章:复合诱变野生酵母ZZ-46选育高产油脂菌株。

 

文摘摘要内容如下:

微生物油脂是微生物在一定条件下产生并储存在细胞内的甘油酯,可作为生产生物柴油的原料。木质纤维素是世界上储量最大的可再生资源,且充分水解后能得到含有葡萄糖和木糖等单糖的混合糖。然而,大多数微生物具有葡萄糖效应,通常会先消耗葡萄糖然后利用其他戊糖,葡萄糖会抑制其他糖的利用,这种效应不仅造成木糖资源浪费,而且导致生产成本较高从而不利于微生物油脂的大规模生产。因此,选育能同时利用葡萄糖和木糖混合糖的高产油脂酵母已经成为微生物油脂技术领域的重要研究方向。

 

本研究为获得能利用葡萄糖/木糖混合糖液的高产油脂菌种,以野生酵母菌株Trichosporon dermatis ZZ-46为出发菌进行常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)-硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES) 复合诱变,并分别以浅蓝菌素和氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)为筛选因子结合尼罗红荧光染色进行高通量筛选,最终选育出1株高产菌株L7。该菌以混合糖为碳源进行摇瓶复筛后,生物量、油脂产量和油脂含量分别达到22.7g/L、11.4g/L和50.5%,较出发菌株分别提高12.6%、33.2%和7.8%;且该菌具有良好的遗传稳定性,其脂肪酸组成与出发菌相同,与植物油相似。

 

传统诱变方法是实现菌株改良的有效途径之一,与单一诱变方法相比,物理化学复合诱变有更高的突变频率。常压室温等离子体诱变育种技术是利用等离子体射流破坏细胞的DNA结构,使细胞启动自身的DNA修复机制,在此过程中会产生基因突变。该技术产生的等离子体浓度高且均匀,具有突变率高、成本低、无污染和操作安全等优点,已被广泛应用于细菌、酵母和真菌等多种微生物的育种。因此,本文利用ARTP和DES诱变技术对可同时利用葡萄糖和木糖混合糖的野生油脂酵母Trichosporon dermatis ZZ-46进行复合诱变处理,以期获得高产油脂酵母,为后续利用纤维素水解液发酵奠定基础。

 

文章精彩内容如下:

 

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2 野生油脂酵母ZZ-46的ARTP致死率曲线

 

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图3 ARTP诱变菌株的相对OD600nm和荧光强度

 

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图8 野生菌株ZZ-46和突变菌株L7的发酵曲线图

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