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本期为您推荐广西大学生命科学与技术学院赵帅副教授研究团队发表在国际知名期刊《Biotechnology for Biofuels》上的一篇文章：ARTP/EMS-combined multiple mutagenesis efficiently improved production of raw starch-degrading enzymes in Penicillium oxalicum and characterization of the enzyme-hyperproducing mutant。

文章摘要内容如下：

原淀粉降解酶(RSDEs)在淀粉加工中可以有效降低能源消耗和加工成本，具有非常重要的应用价值。在自然界中，RSDEs一般由草酸青霉等丝状真菌生产，但产量极低，严重阻碍了原淀粉加工的工业化。随机诱变辅助育种是提高真菌产酶能力的有效途径。

本研究经过多轮ARTP/EMS诱变共得到3532个草酸青霉菌落。其中突变株A2-13的RSDE活性最高，达到162.7U/mL，产量比起始菌株OXPoxGA15A提高61.1%。通过对A2-13培养条件优化，其RSDE活性进一步提高至191.0U/mL。分别用反转录实时定量PCR和基因组重测序方法分析A2-13基因组中多个单核苷酸多态性以及主要淀粉酶表达上调基因，包括原淀粉降解糖化酶基因PoxGA15A及其调控基因PoxAmyR。此外，由A2-13生产的原RSDEs与商品α-淀粉酶联合使用可在40℃条件下有效消化生玉米粉和木薯粉。

经典的物理或化学诱变是一种有效的育种策略，特别是提高酶的产量。化学试剂EMS使核苷酸在随机位置烷基化，从而导致转换突变；ARTP通过产生等离子体射流改变细胞壁和质膜的结构和通透性，导致DNA损伤。ARTP是近年来发展起来的一种有效的诱变技术，本研究通过ARTP/EMS复合诱变有效提高了草酸青霉RSDE产量，突变株在低温下能有效水解原淀粉，为今后淀粉加工提供了一个有效的方法。

文章精彩内容如下：

图2 从每轮突变中分离出的草酸青霉菌株

图4 突变株A2-13和起始菌株OXPoxGA15A产生酶对RNCOF和RNCF水解效果

图5 利用RT-qPCR分析突变株A2-13和起始菌株OXPoxGA15A胞外蛋白和重要淀粉酶基因及其调控基因的转录水平